С каким методом исследователи определили количество молекул ДНК-мишени в образце? Какой Ct был получен для образцов

Пума_2389

68

Для определения количества молекул ДНК-мишени в образце исследователи обычно применяют метод количественной полимеразной цепной реакции (qPCR). Этот метод позволяет амплифицировать (увеличивать количество) ДНК-мишени в образце и измерять количество амплифицированной ДНК на каждом цикле реакции.

Для проведения qPCR исследователи используют специальные праймеры - короткие участки ДНК, которые специфически связываются с ДНК-мишенью и инициируют амплификацию. Количество праймеров и параметры реакции подбираются таким образом, чтобы обеспечить специфическое амплифицирование только целевой молекулы ДНК.

Для измерения количества молекул ДНК-мишени в образце в qPCR используется показатель Ct (цикл пороговой экспоненциальности). Ct - это количество циклов реакции, необходимое для достижения определенного уровня амплификации ДНК. Чем меньше значение Ct, тем больше начальное количество молекул ДНК-мишени в образце.

Обычно при проведении qPCR используют образцы с известным количеством молекул ДНК-мишени (стандартные образцы) для создания стандартной кривой. Эта кривая позволяет установить зависимость между Ct и начальным количеством молекул ДНК. Таким образом, зная Ct для стандартных образцов, можно определить количество молекул ДНК-мишени в неизвестном образце.

Поэтому, чтобы определить количество молекул x ДНК-мишени в опытном образце, исследователям необходимо провести qPCR с использованием стандартных образцов, записать значения Ct для каждого стандарта и затем использовать стандартную кривую для определения количества молекул x ДНК-мишени на основе полученного значения Ct для опытного образца.

Округлив количество молекул до целого числа, можно представить ответ исследователям и следовать их инструкциям для округления числа.